Geneticky modifikované myši

B-NDG knockout mice

NOD.CB17-Prkdc^scid IL2rg^tm1/BcgenHsd

Albino. Model B-NDG je single knockout myš s ultra imunodeficientním fenotypem. Kmen vytvořený delecí IL2rg genu z NOC.SCID myší společností Biocytogen.

Charakteristika

• Deficience T a B buněk
• Postrádá NK buňky
• Postrádá funkční receptory pro IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 a IL-21
• Závažné poškození lymfocytů
• Autosomálně recesivní, jedno nukleotidový polymorfismus s Prkdc genem na chromozomu 16
• Běžný gen gama řetězce (II2rg) narušen
• Deficience v signalizaci cytokinů
• Vysoká schopnost humanizace

Využití

Onkologie, Transplantace rakovinných buněk, Infekční nemoci, Imunologie, Humanizační aplikace

Vlastnosti a výhody

• Závažná imunodeficience – ultra imunodeficientní fenotyp zlepšuje přijmutí nádorových buněk
• Vysoká schopnost humanizace - minimální odmítnutí buněk a tkání odvozených od člověka
• Výrazně potlačen „Leaky“ fenotyp ve srovnání se SCID modely myší

Rag2-Il2rg double knockout mice (R2G2®)

B6;129-Rag2^tm1FwaII2rg^tm1Rsky/DwlHsd

Světle hnědý, bělobřichý. Model R2G2 je double knockout myš s ultra imunodeficientním fenotypem. Kmen získaný z Fox Chase Cancer Center roku 2016 společností INOTIV.

Charakteristika

• Deficience T a B buněk
• Postrádá NK buňky
• Postrádá funkční receptory pro IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 a IL-15
• Závažné poškození lymfocytů
• Inaktivován gen Rag2
• Inaktivován gen II2rg
• Snížená funkce makrofágů, dendritických buněk, neutrofilů

Využití

Onkologie, Transplantace rakovinných buněk, Infekční nemoci, Imunologie

Vlastnosti a výhody

• Závažná imunodeficience – ultra imunodeficientní fenotyp zlepšuje přijmutí nádorových buněk
• Méně citlivý na ozáření – vyšší tolerance radiace ve srovnání s modely se SCID mutací
• Výrazně potlačen „Leaky“ fenotyp ve srovnání se SCID modely myší

B-NDG B2m double knockout plus mice

NOD.CB17-Prkdc^scidIl2rg^tm1B2m^tm1Fcgrt^tm1(B2m)/BcgenHsd

Albino. Model B-NDG B2m je double knockout myš s ultra imunodeficientním fenotypem. Kmen vytvořený delecí IL2rg genu z NOC.SCID myší společností Biocytogen.

Charakteristika

• Deficience T a B buněk
• Postrádá NK buňky
• Postrádá funkční receptory pro IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 a IL-21
• Závažné poškození lymfocytů
• Autosomálně recesivní, jedno nukleotidový polymorfismus s Prkdc genem na chromozomu 16
• Běžný gen gama řetězce (II2rg) narušen
• Deficience v signalizaci cytokinů
• Deficience MHC třídy I
• Vysoká schopnost humanizace

Využití

Onkologie, Transplantace rakovinných buněk, Infekční nemoci, Výzkum onemocnění štěp vs hostitel, Imunologie, Humanizační aplikace

Vlastnosti a výhody

• Závažná imunodeficience – ultra imunodeficientní fenotyp zlepšuje přijmutí nádorových buněk
• Vysoká schopnost humanizace - minimální odmítnutí buněk a tkání odvozených od člověka
• Zvýšené přežití a snížení GvHD ➝ Významné prodloužení přežití a výrazné zpoždění nástupu a snížení závažnosti GvHD u myší B2M/FcRn s naroubovanými lidskými PBMC

B-NDG hIL15 mice

NOD.CB17-Prkdc^scidIl2rg^tm1Il15^tm1(IL15)/BcgenHsd

Albino. Model B-NDG je single knockout myš s ultra imunodeficientním fenotypem. Kmen vytvořený delecí IL2rg genu z NOC.SCID myší společností Biocytogen.

Charakteristika

• Deficience T a B buněk
• Postrádá NK buňky
• Postrádá funkční receptory pro IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 a IL-21
• Závažné poškození lymfocytů
• Autosomálně recesivní, jedno nukleotidový polymorfismus s Prkdc genem na chromozomu 16
• Běžný gen gama řetězce (II2rg) narušen
• Deficience v signalizaci cytokinů
• Vysoká schopnost humanizace

Využití

Onkologie, Transplantace rakovinných buněk, Infekční nemoci, Imunologie, Humanizační aplikace, Úloha NK buněk v tumorigenezi, Hodnocení účinnosti protilátkové léčby

Vlastnosti a výhody

• Závažná imunodeficience – ultra imunodeficientní fenotyp zlepšuje přijmutí nádorových buněk
• Vysoká schopnost humanizace - minimální odmítnutí buněk a tkání odvozených od člověka
• Výrazně potlačen „Leaky“ fenotyp ve srovnání se SCID modely myší
• Exprimuje lidský cytokin IL15 ➝ Schopnost zkoumat vývoj a funkce lidských NK buněk

Humanized ACE2 (hACE2) knockin mice

C57BL/6Hsd-Ace2^em1(ACE2)Env

Angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) je klíčovým enzymem v systému renin-angiotenzin (RAS). RAS reguluje objem krve a arteriální tonus, jako takový je ACE2 častým cílem pro léčbu hypertenze. ACE2 je vysoce exprimován v několika lidských tkáních včetně gastrointestinálního traktu, jater, žlučníku, ledvin, močového měchýře, varlat, placenty a vejcovodů, s nižšími hladinami exprese v plicích a slinivce břišní. Slouží také jako primární receptor pro vstup virů SARS-CoV a SARS-CoV-2 do buněk. Vazba koronavirového spike (S) proteinu na ACE2 iniciuje fúzi buňky a virových membrán pro vstup do buňky. Vazba na protein ACE2-S je kritickým počátečním krokem pro infekci koronavirem a je zkoumána jako potenciální cíl léku na koronaviry.

Tento hACE2 knockin myší model byl vytvořen integrací kodonově optimalizované expresní kazety lidské ACE2 cDNA do myšího genu Ace2 prostřednictvím technologie založené na CRISPR. Výsledkem je, že promotor myšího genu Ace2 a další regulační prvky řídí expresi lidského proteinu ACE2, zatímco ukončují expresi myšího genu Ace2.

Charakteristika

• Exprese lidského ACE2 byla potvrzena měřením hladin mRNA u heterozygotních a homozygotních samic a hemizygotních samců.
• Pozadí kmene: C57BL/6

Využití

Infekční onemocnění, COVID-19, SARS

Humanized Tmprss2 (hTmprss2) knockin mice

C57BL/6Hsd-Tmprss2^{em1(TMPRSS2)Env}

Tmprss2 je transmembránová serinová proteáza, která se účastní virové infekce. Jak viry chřipky, tak lidské koronaviry včetně HCoV-229E, MERS-CoV, SARS-CoV a SARS-CoV-2, závisí na Tmprss2 proteolytickém štěpení (tj. aktivaci) virového spike glykoproteinu, který spouští fúzi virového obalu a membrány hostitelské buňky umožňující viru vstoupit do buňky. Tmprss2 má také klíčovou roli ve vývoji a progresi rakoviny prostaty. Fúze genu TMPRSS2 s onkogenem ERG je nejčastější genomovou alterací u karcinomu prostaty.

Myší model hTmprss2 KI byl vytvořen pomocí technologie založené na CRISPR ke zprostředkování integrace expresní kazety cDNA lidské TMPRSS2 s optimalizovanými kodony do myšího genového lokusu Tmprss2. Výsledkem je, že promotor myšího genu Tmprss2 a další regulační prvky budou řídit expresi lidského proteinu Tmprss2, zatímco exprese myšího genu Tmprss2 bude ukončena.

Charakteristika

• Pozadí kmene: C57BL/6

Využití

Infekční onemocnění, COVID-19, SARS a MERS

Humanized ACE2/Tmprss2 (hACE2/hTmprss2) double knockin mice

C57BL/6Hsd-Ace2^em1(ACE2)EnvTmprss2^{em1(TMPRSS2)Env}

Buněčná infekce koronaviry včetně SARS-CoV a SARS-CoV-2 je dvoustupňový proces, který využívá hostitelské proteiny ACE2 a Tmprss2. Angiotensin-converting enzym 2 (ACE2), klíčový enzym v systému renin-angiotensin, který reguluje objem krve a arteriální tonus, je vstupním receptorem pro SARS-CoV a SARS-CoV-2. Podjednotka S1 koronavirového spike (S) proteinu obsahuje receptorovou vazebnou doménu (RBD), která rozpoznává a váže se na ACE2. Po navázání receptoru Tmprss2 transmembránová serinová proteáza štěpí protein S na spojení podjednotek S1 a S2, což umožňuje fúzi buněčných a virových membrán a následný vstup koronaviru do buňky. Jako takové jsou ACE2 a Tmprss2 zkoumány jako potenciální cíle pro antivirová léčiva.

Modely myší se single knockin hACE2 a hTmprss2 byly vytvořeny integrací kodonově optimalizované lidské ACE2 nebo TMPRSS2 cDNA expresní kazety do příslušného myšího genu pomocí technologie založené na CRISPR. To vede k tomu, že promotor myšího genu a další regulační prvky řídí expresi lidského ACE2 nebo Tmprss2 proteinu, zatímco ukončují expresi příslušného myšího genu. Myš hACE2/hTmprss2 s dvojitým knockinem byla vytvořena křížením modelů myší hACE2 a hTmprss2 s jedním knockinem.

Charakteristika

• Pozadí kmene: C57BL/6

Využití

Infekční onemocnění, COVID-19, SARS a MERS